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八千草薫于1931年生于日本大阪市的一個(gè)職員家庭，1946年進(jìn)入寶冢音樂(lè )學(xué)校，次年進(jìn)入寶冢歌劇團。1951年演出的《文福茶釜》等劇頗受好評，成為引人注目的人物，同年初次參演《寶冢夫人》一片，1954年連續主演稻恒浩導演的《宮本武藏》（共三部），被認為是很有希望的演員。
1955年在日本和意大利合拍的電影《蝴蝶夫人》中扮演女主人公，其出色的演技和優(yōu)美的歌聲使她名噪一時(shí)。繼又參演《亂菊物語(yǔ)》、《白夫人的妖戀》（根據中國民間故事白蛇傳改編）等片，以純情可愛(ài)的少女形象為人所賞。1957年與岸惠子合演豐田四郎導演的《雪國》，在片中扮演葉子一角，頗有好評。同年退出寶冢歌劇團。與比她大17歲的電影導演谷口千吉結婚。
1960年與東寶株式會(huì )社演劇部簽訂專(zhuān)屬契約，在拍攝電影和電視的同時(shí)參演舞臺劇，繼又參演《新·夫婦善哉》（1963）、《你好·小孩》（1964）、《奸細·伊賀住宅》（1965）等片。1965年，因在《美麗與悲哀》一片中的演技獲得第12屆亞洲電影節最佳女配角獎。1972年，被選拔為山田洋次導演的著(zhù)名系列片《男人辛苦·寅次郎夢(mèng)境》（第10級）中的女主人公。繼而又演出寺山修司導演的《在田園中死去》（1974），山本薩夫導演的《不毛地帶》（1976）等片，均有好評，其所塑造的銀幕形象，大都為善良賢惠的女性，一直保持著(zhù)純情的特點(diǎn)，故使許多觀(guān)眾為之傾倒。
中年以后，八千草被譽(yù)為“理想的母親形象”，另曾在電視連續劇《血疑》中扮演大島敏江一角，故為中國觀(guān)眾非常熟悉，生活中的八千草熏與她扮演的角色一樣樸實(shí)勤奮，無(wú)子。
2015年10月21日，出演由小田切讓和尾野真千子主演的電視劇《點(diǎn)心之家》播出。